CCK8实验原理、步骤与优势大盘点，这些你都了解吗？ 保险金外汇管制措施有哪些方面的问题及对策建议

实验是简单的，道路是曲折的，时间就是用来浪费的，科研就是自娱自乐使劲折腾。

我也很努力很认真啊，为啥效率总提不起来呢？

其实，有时候并不是自己不努力，只是没有找对方法。做实验可不能光是埋头苦干，还要学会运用合适的检测试剂盒，这样就能事半功倍。

如果你还在用 MTT，那就真的 OUT 了，MTT 花 4 小时才能得到的结果用 CCK-8 只需 1 小时，CCK-8 可用于细胞增殖和毒性分析，同 MTT 法相比，CCK-8 即开即用，检测时间大概在 1 小时左右。

CCK8是什么

CCK-8的英文全称是Cell Counting Kit-8，也就是进行细胞计数的一个盒子。那它的用途也就大致可以猜到，和细胞增殖、细胞毒性相关的实验都可以。

CCK8的原理

在CCK-8试剂盒中，最主要的化学药品是WST-8，化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐。它的核心基团和MTT是一样的，是MTT的升级版本。在电子耦合试剂（也就是细胞是活的，有呼吸，有能量代谢）存在的情况下，可被NAD+氧化还原成为水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan)。活细胞越多，产生的Formazan就越多，颜色也会越深。

WST-8 检测原理图 EC=electron coupling reagent，即电子耦合试剂

所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。为什么是粗略的呢，因为这里没有考虑到细胞代谢水平的高低，有些细胞在药物处理后，可能活细胞数不变，但是代谢率低了以后，细胞呼吸减弱，NAD+产生减少，测出的Formazan也会减少。

CCK8的用途

1.细胞增殖测定：细胞增殖实验在很多领域都会用到，比如肿瘤相关、损伤后修复等。

2.药物筛选：在测定一个药物的毒性和安全有效浓度时，经常会用到CCK-8。

3.细胞毒性测定：这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响，比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。

4.肿瘤药敏试验：这个是用的比较广的，我见过做肿瘤的团队，买CCK-8都是一整箱，一整箱的买。

5.微生物对细胞的毒性或增殖的实验。

CCK方法的优势

CCK法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

优点：

1.酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰；

2.细胞毒性非常低，因此加入WST-8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。